Влияние цитофлавина на жизнеспособность лейкоцитов периферической крови пациентов с ишемической болезнью сердца

Аннотация

Для определения характера влияния цитофлавина в терапевтической концентрации на жизнеспособность лейкоцитов проведено исследование образцов крови 30 пациентов с ишемической болезнью сердца. Лейкоциты из цельной крови выделяли с помощью микропипетки, смешивали с питательной средой RPMI, в опытные лунки добавляли цитофлавин в концентрации, близкой к терапевтической и пробы инкубировали в течение 3 ч в инкубаторе с 5 % содержанием СО₂ при температуре 37 °C, затем пробы окрашивали флуоресцентными красителями (Mito Tracker^TM Red CMXRos, Calcein AM, Ethidium bromide) и снова инкубировали при тех же условиях ещё в течение 30 мин. Результаты детектировали методом флуоресцентной микроскопии при помощи инвертированного флуоресцентного микроскопа EclipseTi-U (Nikon, Япония) и анализировали с помощью специализированного программного обеспечения EZ-C1 Free Viewer Ver 3.90. Оценивали интенсивность флуоресценции митохондрий и вычисляли индекс жизнеспособности лейкоцитов по разработанной методике. После введения цитофлавина в пробу с лейкоцитарной взвесью наблюдалось два варианта изменения жизнеспособности клеток: у большинства (80 %) больных отмечено увеличение жизнеспособности лейкоцитов, в среднем, на 60 % (p < 0,001) и у 20 % — тенденция к уменьшению данного показателя, в среднем, на 47 % (p < 0,1). Величина флуоресценции митохондрий изменялась в обоих случаях в сторону увеличения, но без достижения достоверности различий. Достоверной корреляции между показателями жизнеспособности клеток и интенсивностью флуоресценции митохондрий обнаружено не было (коэффициент корреляции составил 0,28, p > 0,05). Цитофлавин у 80 % пациентов с ишемической болезнью сердца способен повышать жизнеспособность клеток (лейкоцитов крови), в среднем, на 60 % и таким образом проявлять цитопротекторный эффект.